Actividad biológica del veneno de dos especies de serpientes opistoglifas del departamento del Tolima
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Resumen en español
Las serpientes opistoglifas poseen colmillos posteriores acanalados conectados a la glándula de Duvernoy, la cual produce secreciones tóxicas que ayudan a la captura y pre-digestión de la presa. El veneno de estas serpientes es poco estudiado debido a las dificultades que se presentan en el proceso de extracción del veneno y por ende a obtener suficientes cantidades de veneno para su estudio; sin embargo, han sido reportados casos graves de envenenamientos ocasionados por estas serpientes, lo cual las hace una fuente de estudio importante. Este trabajo evaluó algunos efectos y actividades biológicas in vitro de los venenos de las especies opistoglifas L. annulata y E. bizona in vitro. Se estableció un método de extracción directo utilizando microcapilares, el cual es un procedimiento no invasivo y con el que se obtienen resultados buenos en cuanto a su rendimiento. La toxicidad (DL50) de los venenos de las dos especies evaluadas en ratones (6,5 μg/ml para Leptodeira annulata y 3,5 μg/ml para Erythrolamprus bizona) fue moderadamente alta comparada con otras especies, indicando una importante toxicidad en mamíferos. El veneno de Leptodeira annulata causó un bloqueo moderado de la contracción muscular en aves y uno leve en mamíferos; sin embargo, este veneno redujo la respuesta de acetilcolina y cloruro de potasio exógeno en músculos de ave indicando un daño importante de las fibras musculares, además de inducir una despolarización de la membrana de las células musculares en preparaciones de mamífero. El veneno de Erythrolamprus bizona tuvo efectos muy similares al anterior, pero en una concentración determinada de 30 μg/ml se presentó una súper-estimulación en la respuesta de la acetilcolina indicando una posible acción inhibidora de la acetilcolinesterasa. Los dos venenos estudiados presentaron resultados muy similares en las actividades enzimáticas que se evaluaron: actividad proteolítica muy alta, actividad fosfolipasa A2 baja y actividad por serín proteasas inexistente. Los análisis morfológicos a través de técnicas histológicas revelaron las alteraciones musculares ocasionadas por los venenos, las cuales constan de lesiones delta, necrosis, edema y vacuolización de las fibras. En conclusión, los resultados muestran que el veneno de Leptodeira annulata y Erythrolamprus bizona causan grandes efectos miotóxicos en preparaciones neuromusculares de vertebrados, probablemente debido a la alta actividad proteolítica que envuelve la acción de metaloproteasas. Palabras Clave: Glándula de Duvernoy, Miotoxicidad, Neuromuscular, Opistoglifas.
Resumen en español
Opistoglyphous snakes are characterized by having enlarged grooved posterior maxillary teeth connected to the Duvernoy’s gland, which produces toxic secretions involved in prey capture and pre-digestion. The venom from these snakes has not been studied so much due to the problems on the extraction methods carrying out insufficient venom quantities for investigation; however, there have been several envenomation cases occasioned by these snakes, which make them an important source for research. This research assessed some effects and biological activities of the venom from Leptodeira annulata and Erythrolamprus bizona in vitro. A direct extraction method using micropipette was established, this method is not invasive and it is possible to obtain good quantities of venom; the venom toxicity (LD50) in mice (6.5 μg/ml for Leptodeira annulata and 3.5 μg/ml for Erythrolamprus bizona) was moderately high compared to other species indicating an important lethality in mammals. On the other side, the effects on the neuromuscular activity are interesting, Leptodeira annulata venom caused a moderate blockade of the muscular contractions in birds and a slightly one in mammals, however, this venom abolished the exogenous acethilcoline and potassium chloride response in bird muscles indicating an important damage on muscle fibers, besides, inducing a depolarization of the muscle cells membrane in mammal preparations. Erythrolamprus bizona venom caused very similar effects on bird neuromuscular preparations, but with a specific concentration (30 μg/ml), there was a super-stimulation in the acethilcoline contracture response indicating a possible acethilcolinesterase inhibitor action. Both venoms show very similar results in enzymatic activities, high proteolytic, low phospholipase A2 and no serine protease activity were found. The morphologic observations throughout histological techniques showed muscle alterations like delta lesions, necrosis, edema, and vacuolated muscle fibers occasioned by the venoms. In conclusion, the results show that the venom from Leptodeira annulata and Erythrolamprus bizona produce potent myotoxic effects in vertebrate neuromuscular preparations probably due to the high proteolytic activity involving metalloproteases action. Keywords: Duvernoy’s gland, Myotoxicity, Neuromuscular, Opistoglyphous
