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Comparación de la calidad embrionaria resultante de dos técnicas empleadas en reproducción asistida

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dc.contributor.authorNavarro Carbonell, Doris Elenaspa
dc.contributor.colaboratorLucena Quevedo, Elkin (Asesor)spa
dc.contributor.colaboratorPulido Torres, Carlos Enrique (Director)spa
dc.contributor.colaboratorFrancis Turner, Liliana (Codirector)spa
dc.date.accessioned2015-05-20T19:56:15Z
dc.date.available2015-05-20T19:56:15Z
dc.date.issued2011
dc.description98 Páginasspa
dc.description.abstractMuchos de los estudios realizados actualmente tratan de acercar las técnicas de Fertilización In Vitro (FIV) a las condiciones fisiológicas (in vivo) que se presentan en las primeras fases del desarrollo embrionario, es así como surge la técnica INVO (Intravaginal Culture Oocite) que utiliza la cavidad vaginal de la mujer y sus condiciones fisiológicas (Temperatura, oxígeno y CO2) para equilibrar el medio de cultivo y llevar a cabo la fertilización e incubación inicial del embrión. En este estudio se realizó una comparación de la calidad embrionaria obtenida mediante dos técnicas de fertilización in vitro. El esquema de estimulo que se utilizo en todas las pacientes fue MILD con CC (50-100 mg/día) y FSH (75-150 mg/día), cuando se observaron ecográficamente folículos de 14-16 mm, se empleo Baydol® (Acetamicina) 60 mg con el fin de evitar la ovulación espontánea de la paciente, 10.000UI de hCG fueron aplicadas cuando se tenían folículos de 17-18 mm y a las 36 horas pot hCG se realizó la aspiración folicular. En el laboratorio se procedió a la recuperación de los ovocitos y a su clasificación de acuerdo al complejo cumulus corona ovocito (Inseminación) o por la presencia del primer cuerpo polar (MII) (ICSI). El método de capacitación espermática empleado para el estudio fue el Swim up y el medio de cultivo embrionario fue G2 Plus versión 5 de vitrolife hasta las 72 h, ya fuera en incubadora con O2 20%, CO2 6% y un rango de temperatura de 37°C o un dispositivo (INVOCell) el cual, fue colocado en la cavidad vaginal de la paciente donde la vagina dio las condiciones de temperatura CO2 y O2 necesarias para el cultivo del embrión. Al cabo de los tres días de cultivo los embriones se clasificaron morfológicamente teniendo en cuenta el número y forma de las blastómeras, junto con el grado de fragmentación presentado. Un total de 137 casos fueron realizados en el estudio para 132 transferencias y con 43 pruebas de embarazo positivas a los 12 días postransferencia; la calidad embrionaria fue analizada mediante MANOVA dando diferencias significativas p = 0,0388 entre las dos técnicas de cultivo siendo de mejor calidad los embriones obtenidos mediante el INVO. En cuanto a los porcentajes de implantación (19.14 y 26.68% INVO vs 5 y 12.94% Incubadora), embarazo (30.95% y 48.88% INVO vs 11.11 y 24.32% Incubadora) y aborto (11.11 y 33% INVO vs 100% y 27.27% Incubadora) también se demostró una clara diferencia en los grupos INVO e incubadora siendo mejor en estos aspectos los embriones INVO. La técnica INVO es una buena opción para el tratamiento de parejas con problemas de infertilidad ya que genera embriones de buena calidad desde el punto de vista morfológico, capacidad de implantación, embarazo y bajas tasas de aborto. Se evidenció una clara superioridad en todos los parámetros evaluados donde los grupos INVO sobresalieron dentro del estudio siendo el mejor grupo INVO/ICSI, lo que hace pensar que esta técnica reduce los efectos adversos causados por el ROS generado en las incubadoras y cuando se realiza el ICSI.spa
dc.description.abstractABSTRACT Nowadays, many of the researches try to approach the in vitro fertilization techniques (IVF) to the physiological conditions (in vivo) that are found in the first embryonic development phases, is this how the INVO (Intravaginal Culture of Oocytes) technique arises; This technique uses the woman´s vaginal cavity and her physiological conditions (temperature, oxygen, and CO2) to equilibrate the culture media and to carry out the fertilization and the initial embryo incubation. In this study the obtained embryonic quality by two in vitro fertilization techniques was compared. The stimulation protocol used was MILD with CC and FSH, when it was observed by ultrasound some follicles of 14-16mm it was used Baydol® 60mg (Acetamine), with the purpose of avoiding the spontaneous ovulation of the patient, 10.000UI of HCG were applied when there were follicles of 18mm, and 36 hours later the follicular retrieval was performed. In the laboratory, the oocytes were recovered and classified according to the cumulus-corona-oocyte complex (insemination) or by the presence of the first polar body (MII) (ICSI). The sperm capacitation method employed in the study was “swim up” and the embryonic culture media was G2 Plus version 5 (Vitrolife) until 72 hours; even within incubator with O2 20%, CO2 6% and a range of temperature of 37°C or within the dispositive (INVOCell) which was located in the vaginal cavity of the patient where the vagina gave the temperature CO2 and O2 conditions needed for the embryo culture. After three days of culture, the embryos were morphologically classified taking into account the number and shape of the blastomeres, altogether with the degree of fragmentation presented. A total of 137 cases were performed in the study, with 132 transferences and 43 pregnancy tests with a positive result after 12 days of post transference; the embryo quality was analyzed by MANOVA analysis giving significant differences p=0,0388 between both culture techniques. The best embryos quality obtaining was with INVO. The implantation rates were (19.14 and 26.68% INVO vs. 5 and 12.94% Incubator), pregnancy (30.95% and 48.88% INVO vs. 11.11 and 24.32% Incubator) and abortion (11.11 and 33% INVO vs. 100% and 27.27% Incubator). Besides, there was a clear difference in the INVO and Incubator groups, with better rates obtained within the INVO group. The INVO technique is a good option for the treatment of infertile couples because it generates good quality embryos in terms of morphology, implantation capacity, pregnancy and low abortion rates. In addition, there was a clear superiority in all the parameters in the INVO groups, especially within the INVO/ICSI group, suggesting that this technique reduces the adverse effects caused by the ROS generated in the incubators and when ICSI is performed.spa
dc.description.tableofcontentsINTRODUCCIÓN 17 1. JUSTIFICACIÓN 19 2. OBJETIVOS 21 2.1 OBJETIVO GENERAL 21 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 21 3. ANTECEDENTES Y ESTADO ACTUAL DEL PROBLEMA 22 4. MARCO TEÓRICO 23 4.1 MANEJO DE LA PAREJA INFERTIL 24 4.1.1 Edad de los pacientes 24 4.1.2 Obesidad 24 4.1.3 Análisis del semen 25 4.1.4 Evaluación del útero y las trompas 25 4.1.5 Evaluación de la reserva ovárica 26 4.2 ESTIMULACIÓN OVÁRICA 26 4.2.1 Medicamentos utilizados para la estimulación ovárica 29 4.2.1.1 Citrato de clomífeno (CC) 29 4.2.1.2 Gonadotropinas 29 4.2.1.3 Análogos de la GnRH 29 4.3 ASPIRACIÓN FOLICULAR 30 4.4 LABORATORIO DE FIV 30 4.4.1 Medios de cultivo 31 4.4.1.1 Acidez y pH 31 4.4.1.2 Sistema tampón 31 4.4.1.3 Osmolaridad 32 4.4.1.4 Proteína 32 4.4.1.5 Fuente de energía 32 4.4.1.6 Sales 32 4.4.1.7 Aceite mineral 33 4.4.2 La incubadora 33 4.4.2.1 Oxígeno (O2) 33 4.4.2.2 Gas carbónico (CO2) 33 4.4.2.3 Incubadora de tres gases 33 4.5 EVALUACIÓN DEL OVOCITO 34 4.5.1 Clasificación morfológica del ovocito según el Complejo Cumulus-Corona-Ovocito (CCCO) 34 4 Pag 4.5.2 Evaluación del ovocito decuminado 35 4.5.2.1 Zona Pelucidad (ZP) 36 4.5.2.2 Espacio perivitelino (EP) 36 4.5.2.3 Primer cuerpo polar (CP) 37 4.5.2.4 Vacuolas y granulación citoplsmática 37 4.6 CAPACITACIÓN DEL SEMEN 37 4.6.1 Separación por Swim-up 40 4.7 INSEMINACIÓN 41 4.8 INYECCIÓN INTRACITOPLASMÁTICA DE ESPERMATOZOIDES (ICSI) 42 4.9 CULTIVO INTAVAGINAL DE OVOCITOS (INVO) 43 4.9.1 Condiciones de cultivo intravaginal 44 4.10 DESARROLLO Y CALIDAD EMBRIONARIA 44 4.10.1 Morfología pronuclear 45 4.10.2 Morfología embrionaria 46 4.10.2.1 Número y forma de las blastomeras 46 4.10.2.2 Fragmentación 48 4.11 CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE EMBRIONES 48 4.12 TRANSFERENCIA EMBRIONARIA 49 4.13 VITRIFICACIÓN 50 4.14 IMPLANTACIÓN Y EMBARAZO 52 5. METODOLOGÍA 53 5.1 ESTIMULACIÓN OVARICA Y ASPIRACIÓN 53 5.2 CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA 53 5.3 CLASIFICACIÓN DE OOCITOS 54 5.4 INSEMINACIÓN POR FIV 55 5.5 INYECCIÓN INTACITOPLASMÁTICA DE ESPERMATOZOIDES (ICSI) 55 5.6 PROCEDIMIENTO INVO 56 5.7 CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE LOS EMBRIONES 57 5.8 TRANSFERENCIA EMBRIONARIA 57 5.9 VITRIFICACIÓN 58 5.10 TASA DE IMPLANTACIÓN, EMBARAZO Y ABORTO 59 5.11 ANÁLISIS ESTADÍSTICO 59 6. RESULTADOS 61 6.1 DESCRIPCIÓN DE LOS PACIENTES 61 6.1.1 Edad de los pacientes 61 6.1.2 Peso de las pacientes 61 6.1.3 Número de óvulos recuperados en la aspiración 61 5 Pag 6.1.4 Factores de infertilidad 62 6.1.4.1 Factores de infertilidad en la mujer 62 6.1.4.2 Factor masculino 63 6.2 CALIDAD EMBRIONARIA 65 6.3 TASAS DE IMPLANTACIÓN 68 6.4 TASA DE EMBARAZO 69 6.5 TASA DE ABORTO 70 6.6 CONDICIONES AMBIENTALES DE CULTIVO 70 7. DISCUSIÓN 72 7.1 EDAD DE LOS PACIENTES 72 7.2 PESO CORPORAL DE LAS PACIENTES 72 7.3 ESTIMULACIÓN OVÀRICA Y CALIDAD OVOCITARIA 73 7.4 INSEMINACIÓN Vs ICSI 74 7.5 MEDIO AMBIENTE 75 8. CONCLUSIONES 78 9. RECOMENDACIONES 79 REFERENCIAS 80 ANEXOS 90spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.citationNavarro Carbonell, Doris Elena. Comparación de la calidad embrionaria resultante de dos técnicas empleadas en reproducción asistida (ra): fiv vs invo. Ibagué: Universidad del Tolima, 2011. <http://repository.ut.edu.co/handle/001/1394>spa
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dc.language.isospaspa
dc.publisherIbagué: Universidad del Tolima, 2011.spa
dc.publisher.providerCountry170 COL COspa
dc.rightsAtribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Colombia (CC BY-NC-SA 2.5 CO)spa
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessspa
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/co/spa
dc.subjectFertilización in vitrospa
dc.subjectFIVspa
dc.subjectINVOspa
dc.subjectOvocito madurospa
dc.subjectCalidad embrionariaspa
dc.subjectFragmentaciónspa
dc.subjectIVFspa
dc.subjectOocyte matureeng
dc.subjectQuality embryoeng
dc.subjectFragmentationeng
dc.thesis.disciplineFacultad De Ciencias Básicas, Maestría En Ciencias biológicasspa
dc.thesis.grantorPulido Torres, Carlos Enrique (Director)spa
dc.thesis.grantorFrancis Turner, Liliana (Codirector)spa
dc.thesis.grantorLucena Quevedo, Elkin (Asesor)spa
dc.thesis.levelMaestríaspa
dc.thesis.nameMagíster en Ciencias Biológicasspa
dc.titleComparación de la calidad embrionaria resultante de dos técnicas empleadas en reproducción asistidaspa
dc.typeTrabajo de grado - Maestríaspa
dc.type.dcmi-type-vocabularyTextspa
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/masterThesisspa
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/updatedVersionspa
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