Regenarión in vitro vía organogénesis y aislamiento de protoplastos de Gmelina arborea a partir de plantas in vitro
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Resumen en español
Gmelina arborea es una especie forestal de importancia comercial para países tropicales debido a características de rápido crecimiento y alta calidad de su madera en diversos usos industriales. Pero a pesar de la gran aceptación y potencial de esta especie introducida, es muy escaso el avance en términos de cultivo in vitro. Gracias al uso de técnicas biotecnológicas como la regeneración in vitro y el aislamiento de protoplastos, el mejoramiento genético se ha visto favorecido. La regeneración, ha facilitado la producción y el establecimiento de plantaciones de forestales con características que permiten un mejor comportamiento en campo, gracias a la generación de protocolos in vitro los cuales son de gran importancia para la producción de un material mejorado. Ademas, la obtención de protoplastos permite que técnicas como la hibridación somática, y la transformación genética puedan ser aplicadas con fines de mejoramiento o facilitando el estudio funcional de genes, sin necesidad de obtener una planta completa. Por lo tanto este trabajo buscó llenar los vacíos que se presentan para Melina en cuanto a protocolos de regeneración y aislamiento de protoplastos. Se encontró que el explante con mejor capacidad morfogenética fue el nudo cotiledonar a concentraciones de BAP 2,2 μM y AIA 0,7 μM y BAP 4,4 μM con un promedio de 4,25 brotes por explante a los 14 días. Para el aislamiento de protoplastos el mejor tratamiento fue celulasa R10 1,5% y macerozima R10 0,5% a las 10 horas con un promedio de 9x105 protoplastos por ml. Palabras claves: Gmelina arborea, regeneración in vitro, aislamiento de protoplastos, auxinas, citoquininas, celulasa, macerozima.
Resumen en español
Gmelina arborea is a forest specie of commercial importance for tropical countries, due to its fast growing characteristics and high quality of its wood in various industrial uses. But in spite of the great acceptance and potential of this species introduced in the country several decades ago, the advance in terms of in vitro culture is very little. However, thanks to the use of biotechnological techniques such as in vitro regeneration and protoplast isolation, genetic improvement has been favored. Regeneration has facilitated the production and establishment of plantations of forest species with characteristics that allow better performance in the field, thanks to the generation of in vitro protocols which are of great importance for the production of an improved material. On the other hand, the production of protoplasts allows techniques such as somatic hybridization and genetic transformation to be applied for breeding purposes. In addition, they facilitate the functional study of genes or evaluating genes, without the need to obtain a complete plant. Therefore, this work seeks to fill the voids that are presented for Melina in protocols of regeneration and isolation of protoplasts. Where as a final results the explant with the best morphogenetic capacity was found to be the cotyledonary node at concentrations of BAP 2.2 μM and AIA 0.7 μM and BAP 4.4 μM with an average of 4.25 shoots per explant at 14 days. For the isolation of protoplasts the best treatment was cellulase R10 1.5% and macerozyme R10 0.5% at 10 hours with an average of 9x105 protoplasts per ml. Keywords: Gmelina arborea, in vitro regeneration, protoplast isolation, auxins, cytokinins, cellulase, macerozyme.